对于质粒DNA（<10kb）, 0.6µg的DNA与8pmol的引物混合，最终体积为12µl。

对于Cosmid/BAC-DNA, 2µg的DNA与8pmol的引物混合至12µl。

对于已纯化（试剂盒纯化，切胶纯化或Exo-SAP纯化）的PCR产物，请按20-50ng/kb与8pmol的引物混合，最终体积为12µl。 例如，长度为500bp的PCR产物取25ng与8pmol的引物混合并调节最终体积至12µl。